Izvedli smo medvrstno presaditev zarodnih celic iz potočne postrvi Salmo trutta in lipana Thymallus thymallus v ameriško postrv Oncorhynchus mykiss z namenom izboljšanja obstoječih praks pri ohranjanju genetskih virov ogroženih salmonidnih vrst na Balkanskem polotoku. Obstoječe metode ohranjanja večinoma vključujejo gojenje genetsko čistih osebkov rib izlovljenih v izoliranih vodotokih in repopulacijo vodotokov s potomci le-teh. pojavila se je potreba po dodatnih ex situ strategijah ohranjanja, kot je nadomestna proizvodnja. Za namen medvrstne transplantacije smo optimizirali več korakov eksperimentalnega dela, kot je izolacija velikega števila živih zarodnih celic in fluorescenčno označevanje celic, ki so bile namenjene transplantaciji. Izolirane in označene zarodne celoice potočne postrvi in lipana smo intraperitonealno prenesli v 3 do 5 dni stare ličinke ameriške postrvi. Preživetje transplantiranih ličink je bilo primerljivo s kontrolami. Šestdeset dni po presaditvi smo v gonadah rib prejemnic odkrili fluorescentno označene donorske celice, kar kaže na uspešno vključitev zarodnih celic (spermatogoniji in oogoniji potočne postrvi - 27%; lipan - 28% oz. 23%). PCR pomnoževanje fragmentov donorskih mtDNA znotraj gonad rib prejemnic je dodatno potrdilo uspešno vključitev transplantiranih celic. Predstavljena metoda transplantacije je prvi korak in možen začetek uporabe tehnologije pri ohranjanju in revitalizaciji genskih virov ogroženih in endemičnih vrst ali populacij salmonidnih rib in tako predstavlja nove ali izboljšane strategije upravljanja za te vrste.
COBISS.SI-ID: 4073096
Zaradi pomanjkanja protokolov za krioprezervacijo ribjih jajčec in zarodkov so alternativne tehnike, ki omogočajo shranjevanje ženskih genskih virov, ključnega pomena za nadaljnji razvoj upravljanja reprodukcije v konzervacijski biologiji in ribogojstvu. Optimizirali smo protokol za vitrifikacijo ovarijskega tkiva mladic potočne postrvi Salmo trutta. Uporabili smo metodo iglične potopne vitrifikacije (NIV), pri kateri smo jajčnike pripeli na akupunkturno iglo, jih prestavili v skozi ekvilibracijske in vitrifikacijske raztopine, ki so vsebovale različne kombinacije in koncentracije metanola (MeOH), propilen glikola (PG) in dimetil sulfoksida (Me2SO) in nato potopili v tekoči dušik. Z uporabo vitrifikacijske raztopine, ki vsebuje enake koncentracije krioprotektantov (3M Me2SO in 3M PG), smo dosegli najvišjo stopnjo preživetja oogonijskih celic (do 40%) ter kvalitativno in kvantitativno nespremenjene perinukleolarne folikle. Metoda, razvita za potočne postrvi, se lahko uporabi za ohranjanje ženskih genskih virov drugih salmonidnih vrst, vključno z ogroženimi in endemičnimi vrstami ali populacijami.
COBISS.SI-ID: 3887496