V raziskavi smo želeli opredeliti razlike v lipidnih profilih urotelijskih celičnih modelov v povezavi z njihovo invazivnostjo. Primerjalne lipidomske študije so bile narejene na celičnih linijah RT4 in T24, ki sta celična modela za preučevanje neinvazivne urotelijske papilarne neoplazije in invazivne urotelijske neoplazije. Naši rezultati kažejo na to, da se oba rakava celična modela zelo razlikujeta v celičnih membranah in njenih lipidnih sestavah. Razlike med celičnima linijama RT4 in T24 kažejo na to, da imata obe celični vrsti različni organizaciji membran, kar vpliva na fluidnost in funkcije membran, ki so s tem povezane. Membrane mišično-invazivnih celic T24 so manj toge in oblikujejo manj medceličnih stikov, a več tunelskih membranskh nanocevk, kar je ključno za premikanje, invazijo in večji metastaski potencial te celične linije. Razlike v lipidnem profilu med obema celičnima linijama smo še dodatno potrdili z uporabo fluorescenčno označenega egerolizina, OlyA-mCherry, ki smo ga razvili v naših laboratorijih.
COBISS.SI-ID: 3968591
Čeprav je vezikulacija celičnih membran konstitutiven proces, jo lahko sprožimo z različnimi zunanjimi fizikalno-kemijskimi dejavniki. V študiji smo podrobno raziskali proces vezikulacije ledvičnih epitelijskih pasjih celic (celice MDCK), v prisotnosti fluorescenčno označenega egerolizina, OlyA-mCherry. V raziskavi smo pokazali, da vezikulacija celic MDCK, ki je bila sprožena z OlyA-mCherry ni odvisna od temperature ali povišane koncentracije Ca2+ ionov. Proteomske analize so pokazale, da izolirani zunajcelični vezikli (ZV) vsebujejo 71 vrst proteinov. Proteini so bili po izvoru predvsem iz citosola in jedra in le nekaj proteinov je bilo membranskega izvora. Lipidom celic in ZV smo analizirali s tekočinsko kromatografijo v povezavi z masno spektrometrijo in visokoločljivostno nuklearno magnetno resonanco, s pomočjo katerih smo lahko določili fosfolipide in glikosfingolipide s ceramidnim ogrodjem. V celicah smo identificirali 218 različnih lipidnih zvrsti, medtem ko smo v ZV določili 84 lipidnih vrst. V publikaciji smo tako pridobljene ZV predlagali kot nov model za biofizikalne študije celičnih membran in kot biokemijsko orodje za ne-invazivno vzorčenje citosolnih proteinov iz celice. Ta dognanja nam bodo pomagala tudi v nadaljnjih raziskavah membran tunelskih membranskih nanocevk.
COBISS.SI-ID: 3971151
V delu smo proučevali celično distribucijo, internalizacijo in protitumorsko delovanje funkcionaliziranih nanodelcev z vezano plazmidno DNA proti genu Mcam (melanoma cell adhesion molecule). Nanodelce smo injicirali intratumorsko v subkutano inducirane melanome. Zunanje magnetno polje je povečalo uspešnost vnosa nanodelcev iz medceličnega prostora v celice melanoma in značilno zmanjšalo rast tumorjev. Rezultati tega dela so prispevali tudi k lažjemu nadaljnjemu načrtovanju in uresničevanju programa raziskovalnega projekta.
COBISS.SI-ID: 32548569