S presejalnimi analizami nekaterih pogostih rastlinskih triterpenoidov in fitosterolov v ekstraktih kutikularnih voskov različne zelenjave (bučke, jajčevec, paradižnik, rdeča paprika, blitva, špinača, solata, beli radič di Castelfranco, radič Leonardo, belo zelje, rdeče zelje in ohrovt), ki smo jih izvedli s tremi TLC metodami, smo potrdili, da je proučevana zelenjava potencialni vir triterpenoidov in fitosterolov. Razvili smo prvo TLC-MS2 metodo, ki omogoča identifikacijo osmih triterpenoidov (lupeol, α-amirin, β-amirin, cikloartenol, cikloartenol acetat, lupeol acetat, lupenon in friedelin) in dveh fitosterolov (β-sitosterol in stigmasterol) v ekstraktih zelenjave. Prednosti te metode so: (1) zadovoljiva ločba ciljnih spojin; (2) razlikovanje med spojinami na podlagi barve lis; in (3) možnost razlikovanja med spojinami glede na njihove MS in MS2 spektre. Za razlikovanje med MS2 spektri spojin, ki se eluirajo blizu skupaj, smo predlagali značilne produktne ione. Poleg tega smo si identifikacijo spojin olajšali z izdelavo masno spektralne knjižnice z MS2 spektri ciljnih spojin in z “glava-rep” (angl. “head to tail”) načinom primerjave ustreznih MS2 spektrov spojin vzorcev in standardov zagotovili visoko stopnjo zanesljivosti rezultatov. Razvita metoda z uporabo kemijske ionizacije pri atmosferskem tlaku (APCI) v pozitivnem načinu podaja poleg informacije o molekulski masi tudi strukturne informacije o spojini, kot so npr. funkcionalne skupine. S takšnim pristopom smo v zelenjavnih voskih identificirali številne spojine, od katerih smo jih več kot polovico prvi identificirali v določeni vrsti zelenjave.
COBISS.SI-ID: 5635354
Predstavljena je novo razvita celostna tehnika TLC x GC z uporabo vzorčenja iz nadprostora. Glavna prednost tega pristopa je, kot smo dokazali na primeru analize lipidov, možnost vključitve transesterifikacije gliceridov v metilne estre maščobnih kislin, ker ni posebnih časovnih omejitev pri sklopitvi TLC in GC tehnike. Poleg tega, da je to cenovno ugodna rešitev, omogoča tehnika TLC x GC z uporabo vzorčenja iz nadprostora veliko prednosti z vidika fleksibilnosti pogojev separacije in modulacije vzorčenja. Tehnika omogoča linearno območje preko dveh dekad pri TLC nanosih okrog 1 mg vzorca z dobro ponovljivostjo in točnostjo, kar smo dokazali preko večkratnega zaporednega vzorčenja iz nadprostora. Tehnika predstavlja možno alternativo uveljavljeni, a dražji tehniki HPLC x GC. Uporabno delovno območje tehnike TLC x GC v smislu hlapnosti analitov bi bilo možno še dodatno razširiti z razvojem vzorčevalnih naprav na osnovi termične desorpcije.
COBISS.SI-ID: 5728538
Čaj iz cvetov kamilice (Matricaria recutita L., Asteraceae) se zaradi prijetnega okusa in medicinskih razlogov že stoletja veliko uporablja, vendar obstaja problem razlikovanja prave kamilice s cvetovi drugih rastlin iz družine Asteraceae, ki so navidez podobni cvetovom kamilice in lahko pri nabiranju v naravi hitro zavedejo laike ter celo zaidejo v prodajo. Detekcija tovrstnih adulterantov igra torej ključno vlogo pri zagotavljanju javnega zdravja v smislu preprečevanja toksičnosti (npr. pirazolidinski alkaliodi) in neučinkovitih tretmajev (odsotnost ali prenizka koncentracija aktivne učinkovine). Razvili in validirali smo HPTLC metodo za določanje apigenin 7-O-glukozida, ki je eden od aktivnih markerjev v cvetovih kamilice. Z metodo smo na osnovi profiliranja (fingerprinting) uspeli razlikovati med kamilico in kamilici podobnimi rastlinskimi materiali, t.j. Anthemis spp., Bellis spp., Chrysanthemum sp. in Tanacetum sp., ki jih je zmotno zaradi zamenjave s kamilico nabralo lokalno prebivalstvo. Separacijo smo izvedli na silikagelni 60 NH2 F254s HPTLC plošči z uporabo topila za razvijanje etil acetat–metanojska kislina–ocetna kislina–voda (30:1.5:1.5:3, v/v/v/v). Razvita metoda je uporabna tudi za preverjanje kakovosti kamiličnih čajnih izdelkov, ki so na tržišču.
COBISS.SI-ID: 5627162
Določili smo antocianinsko sestavo tako modre (Triticum aestivum L., cv. Skorpion) in vijolične (Triticum aethiopicum JAKUBZ cv. Abyssinskaja arrasajta cv. Abyssinskaja arrasajta) pšenice in iz njiju pripravljenega modrega in vijoličnega kruha. V modri oz. vijolični pšenici smo s pomočjo nove alalizne metode na osnovi tekočinske kromatografije in masne spektrometrije (LC-MS) okvirno identificirali 19 oz. 26 različnih antocianinov. Celokupna vsebnost antocianinov v modri pšenici je bila 9,26 mg/kg, v vijolični pa 13,23 mg/kg. Kruh smo pekli pri 240°C in pri 180°C ter v pečenem kruhu potrdili vpliv temperature na razlike v sestavi antocianinov. Vsebnost cianidin-3-glukozida, delfinidin-3-glukozida in pelargonidin-3-glukozida smo določili v začetnem materialu, moki in kruhu. Obe sorti pšenice sta primerni za peko kruha, saj vnos antocianinov lahko pomembno vpliva na preprečevanje razvoja bolezni.
COBISS.SI-ID: 4541560
To poglavje opisuje dve tehniki, ki temeljita na uporabi centrifugalne sile: rotacijska planarna kromatografija (RPC; angl. rotation planar chromatography, centrifugal layer chromatography) in rotacijska planarna ekstrakcija (RPE; angl. rotation planar extraction). Poglavje obsega teoretične aspekte RPC tehnike: razvoj in trenutno stanje instrumentacije, karakteristike RPC tehnik in praktične vidike RPC, pripravo kromatografskih plošč, cirkularni, anticirkularni in linearni način separacije, popolnoma off-line, on-line in mešane načine separacije. Opisana je tudi klasifikacija različnih tehničnih rešitev, večkratno razvijanje in tudi več aplikacij na področju analizne, mikropreparativne in preparativne ločbe z uporabo plošč in planarnih kolon. Predstavljena je tudi multifunkcionalna tehnična rešitev, ki omogoča RPE, analizno in preparativno separacijo naravnih spojin iz različnih rastlinskih matric.
COBISS.SI-ID: 5829146