Za detekcijo viroidov se najpogosteje uporabljajo metode na osnovi nukleinskih kislin, kot sta molekularna hibridizacija in RT-PCR. V primeru hude oblike viroidne zakrnelosti hmelja, ki je prisotna v Sloveniji, so v okuženih rastlinah lahko prisotni tudi trije viroidi hkrati, kar povečuje stroške detekcije, zato je smiselna uporaba metod, ki omogočajo hkratno detekcijo viroidov. S tem namenom smo razvili diagnostično metodo mRT-PCR za hkratno detekcijo vseh štirih hmeljevih viroidov. Z uporabo mRT-PCR se skrajša čas analize in zmanjša poraba reagentov in s tem cena analiz. Metoda se lahko uporablja tako za rutinska testiranja simptomatičnih rastlin iz polja, testiranja v okviru certifikacijskih shem sadilnega materiala, kot tudi za epidemiološke študije.
B.03 Referat na mednarodni znanstveni konferenci
COBISS.SI-ID: 8259705Tehnike umetnih okužb predstavljajo pomembno orodje v rastlinski virologiji in se lahko uporabljajo v študijah vrednotenja odpornosti, pri določanju gostiteljske specifičnosti, epidemioloških študijah in interakcijah med rastlinami in patogeni. Z namenom razvoja zanesljive metode za določanje odpornosti hmelja na CBCVd smo primerjali 4 različne inokule, ki so bili narejeni na osnovi RNA in izvlečkov soka okuženih rastlin. Rastline smo okuževali z injiciranjem in drgnjenjem inokula ob liste posute z silicijevim peskom. Poskus smo izvedli na 6 inokulatorskih rastlinah: 2 sortah kumar, 2 sortah paradižnika, jajčevcu in ginuri. Testiranje je pokazalo najboljše rezultate pri uporabi izvlečka soka in drgnjenju inokula ob listje. Z metodo smo uspeli okužiti obe sorti kumar in paradižnika ter jajčevec.
B.03 Referat na mednarodni znanstveni konferenci
COBISS.SI-ID: 8301433V okviru znanstvene konference smo predstavili raziskave obvladovanje viroidnih obolenj na hmelju v Sloveniji. Do sedaj so na hmelju poznani 4 viroidi, med katerimi so Hop latent viroid (HLVd), hop stunt viroid (HSVd) in Citrus bark cracking viroid (CBCVd) prisotni v Sloveniji. Največ škode nastaja zaradi okužb CBCVd, ki povzroča nevarno bolezen hudo viroidno zakrnelost hmelja. Predstavljene so bile epidemiološke raziskave usmerjene v proučevanje kritičnih točk širjenja, ki so bistveno prispevale k izboljšanju izvajanja ukrepov preprečevanja in eradikacije. Omenjene raziskave so bile podlaga za spremembo zakonodaje, ki v Sloveniji ureja preprečevanje širjenja viroidnih obolenj ter predlogov ukrepov na nivoju EU.
B.03 Referat na mednarodni znanstveni konferenci
COBISS.SI-ID: 8301689