Cistatin F je bil predlagan kot regulator celične citotoksičnosti NK celic, saj inhibira glavni konvertazi grancimov, to je katepsina C in H. Za preverjanje te hipoteze smo pripravili variante cistatina F in analizirali njihov vnos, subcelični transport, inhibicijo peptidaz in vpliv na citotoksičnost NK-92 in primarnih NK celic. Ugotovili smo, da je glikozilacijski profil odgovoren za izločanje, vnos in znotrajcelično razvrščanje cistatina F. Aktivni, N-končno cepljeni monomerni cistatin F se tudi lahko privzame s citotoksičnimi celicami. Prenese se v endosome/lizosome in deluje tudi v celicah, ki ne izražajo aktivacijske peptidaze. Mutante cistatina F, ki so sposobne internalizacije in transporta po endo/lizosomski poti, značilno znižajo aktivnost katepsinov C in H, tako in situ po transfekciji celic, ali pa in trans, s prevzemom iz gojišča. Inkubacija stimuliranih NK-92 celic in primarnih NK celic z mutantama intaktnega in N-končno cepljenega cistatina F značilno zavre od granul pogojeno celično citotoksičnost.
COBISS.SI-ID: 30930471
Pokazali smo, da primarne NK celice lizirajo rakave in rakave matične celice in da anti-CD16 protitelo in monociti inducirajo deljeno anergijo NK celic, ki se kaže v zmanjšanju njihove citotoksičnosti. Na tem modelu primarnih NK celic smo dokazali, da je skrajšana monomerna oblika cistatina F, ki inhibira aktivnost katepsinov C in H, značilno povišana v anergičnih primarnih celicah.Dokazali smo, da cistatin F kolokalizira s katepsinoma C in H v endosomsko/lizosomskih veziklih NK celic. Posledično so zreli obliki katepsinov C in H, ki aktivirajo prograncime, značilno znižane.
COBISS.SI-ID: 3878769
Lektini so bili predlagani kot nosilne molekule za ciljan vnos zdravil. Za vnos cistatinov v tumorske celice smo testirali gobji lektin MpL. MpL se vnese v celice z od klatrina odvisno endocitozo in preide najprej v Golgijev aparat, nato pa v lizosome. Pripravili smo fuzijski protein med MpL in cistatinom C. Fuzijski protein je zmanjšal znotrajcelično razgradnjo ECM in invazivnost tumorskih celic, kar kaže na učinkovito delovanje vnesenega cistatina. MpL je uporaben za vnos proteinskih učinkovin v tumorske celice, še posebej če ciljamo tarče v Golgijevem aparatu in lizosomih.
COBISS.SI-ID: 30318887
Poznano je bilo da imajo NK celice specifično vlogo pri eliminaciji zdravih matičnih celic. (e.g. hMSC, hDPSC, hESC, hiPSC) in rakavih matičnih celic, ne pa njihovih diferenciranih oblik. Predlagali smo, da so CD16+CD56dimCD69 NK celice pomembne za selekcijo matičnih celic, medtem ko CD 16dim/CD56dim/+CD69+ povzročijo anergijo in so pomembne za diferenciacijo in eventuelno regeneracijo tkiv kot odgovor na vnetje, delujejo torej kot NKreg celice. Koncept deljene anergije NK celic in generacija NKreg celic z ozirom na celično diferenciacijo, regeneracijo tkiv in resistenco do tumorskih celic je obravnavan v tem članku.
COBISS.SI-ID: 3746673
Cisteinski katepsini so lizosomske proteaze, udeležene v različnih procesih naravne in pridobljene imunosti. V tem revialnem članku smo se osredotočili na vlogo cisteinskih katepsinov in njihovih inhibitorjev v molekularnih mehanizmih celične citotoksičnosti limfocitov T in NK celic in predstavili nove možnosti za regulacijo njihovega delovanja v patoloških procesih.
COBISS.SI-ID: 3788913