Članek opisuje celostno opredelitev protein-PEG konjugata (biofarmacevtik) z dvema različnima tehnikama separacije, in sicer s pretočnim sistemom z asimetričnim prečnim pretokom (AF4) in velikostno izklučitveno kromatografijo (SEC), obe sklopljeni z zaporedno vezanimi detektorji: ultavijoličnim detektorjem, detektorjem na sipanje svetlobe pri več kotih, detektorjem na dinamično sipanje svetlobe in detektorjem na lomni količnik (UV-MALS(QELS)-RI). Kot komplementarno tehniko smo uporabili tudi masno spektrometrijo in sicer spektrometer na čas preleta ionov in lasersko desorpcijo/ionizacijo s pomočjo matriksa (MALDI-TOF). Rezultati AF4 tehnike in SEC z dvema zaporedno vezanima kolonama, pri čemer sta bila oba sistema sklopljena z zaporedno vezanimi detektorji, kažejo, da je kemijska sestava protein/PEG v konjugatu enaka 1/1, v sledovih pa vzorec vsebuje še nezreagiran protein in visokomolekularne asociate z enako kemijsko sestavo kot konjugat. Ker je delež asociatov manjši v acetatnem pufru z dodanim 5% sorbitolom kot v acetatnem pufru z 200 mM NaCl, je prvi puferski sistem primernejši za dolgoročno hranjenje konjugata. Z ločbo na samo eni SEC koloni smo dobili slabo ločena vrhova za konjugat in visokomolekularne asociate, MALDI-TOF MS pa je poleg konjugata identificiral še prisoten nezregairan protein v vzorcu, ni pa identificiral asociatov.
COBISS.SI-ID: 5034522