Sledilci časa (zeitgebers) v perifernih organih so režim hranjenja, svetloba, hormone in njihove signalne kaskade. cAMP signaliziranje preko s cAMP odzivnim modulatorjem CREM in njegovim različicam ICER je povezan s SCN in cirkadianim uravnavanjem sinteze melatonina, o vplivu na periferne organe pa je znanega malo. Z našimi poskusi smo preverili, kateri geni centralne ure so v jetrih in adrenalni žlezi uravnavani s CREM /ICER, v odostnosti svetlobe in brez časovnega doziranja hrane. Ugotovili smo, da je in vivo izguba Crem povzročila fino uravnavanje vseh merjenih genov centralne ure v adrenalni žlezi (Per 1,2,3, Cry 1,2, Bmal1, Rev-erb), medtem ko je bil učinek v jetrih le na Per1 and Cry1 . Icer se izraža cirkadiano v adrenalni žlezi z maksimumom izražanja pri ZT 12 in največjo količino proteinov pa pri ZT 20. Icer in Per1 se oba odzivata na zgodnjo stimulacijo s cAMP. V nesmrtnih celicah forskolin stimulira izražanje Per1 po 2 urah, na novo tvorjeni protein pa privede to zmanjšanja izražanja Per1. S številnimi poskusi smo dokazali smo, da je ta protein ICER. Predlagamo, da Icer deluje kot filter za različne signale, ki privedejo do izražanjagenov v adrenalni žlezi. Tako je Icer nov od časa odvisen nadzorni mehanizem adrenalne žleze.
COBISS.SI-ID: 30528473
Spolne razlike v mehanizmu zaznavanja holesterola pri miših
COBISS.SI-ID: 3268744
Preiskovali smo citokrom P450 CYP51A1 , ki kodira lanosterol 14α-demetilazo iz sinteze holesterola. Ta vzdrževalni gen do sedaj ni bil povezan z boleznimi pri človeku. Z direktnim sekvenciranjem CYP51A1 pri 188 ženskah, ki so spontano rodile prezgodaj in pri 188 sorodstveno nepovezanih otrokih, ki so se rodili prezgodaj (pred tednom 37), smo našli 22 različic gena, od katerih je 10 redkih in novih. Pri otrocih smo našli 2 novi različici gena, kjer sta programa PolyPhen2 in SIFT napovedala škodljiv učinek spremembe p.Tyr145Asp v regiji, ki prepozna substrat, medtem ko učinek p.Asn193Asp ne bi smel biti škodljiv. Napovedi smo preverjali z molekularnim modeliranjem. Pokazali smo, da sprememba Tyr145Asp spremeni elektrostatiski potencial površine proteina CYP51 in podaljša razdaljo do hema, kar prepreči nastanek vodikove vezi. Mutacija CYP51 Tyr145Asp je redka in zato zelo zanimiva za nadaljnje študije povezave med strukturo in funkcijo. Od 12 pogostih različic gena CYP51A1 smo izbrali rs6465348, ki ima visoko frekvenco manjšega (angl. minor) alela za nadaljnje na družinah osnovane študije. Ta pogosta različica CYP51A1 je statistično značilno povezana s premajhno velikostjo za gestacijsko starost novorojenčkov (p = 0.028) in z nižjim krvnim celokupnim in LDL holesterolom pri materah v 2. trimestru nosečnosti. (p = 0.042 and p = 0.046). Rezultati kažejo na novo povezavo med genom CYP51A1 iz sinteze holesterola in z nosečnostjo povezanimi patologijami.
COBISS.SI-ID: 31046873