Experimentalno in teoretično smo pokazali pomen interakcije DNA z membrano ter korelacijo z učinkovitostjo genske elektrotransfekcije. Raziskava je bila opravljenja v sodelovanju s ksupino iz Francije, vodja dr. M.P. Rols, CNRS, Tolouse. Kot prvi smo tudi sistematično primerjali različne protokole električnih pulzov za gensko elektrotransfekcijo: dolge pulze (nekaj ms), kratke pulze (nekaj 100 mikros) in kombinacije visokonapetostnih HV in nizkonapetostnih LV pulzov. Hkrati smo analizirali učinkovitost transfekcije, preživetje in kvantificirali interakcijo z membrano. Pokazali smo, da za aplikacije in vivo in v kliniki je bolj primerno uporabiti nabore dolgih pulzov ali kombinacij HV+LV pulzov,saj tako dosežemo največjo učinkovitost. V primeru, ko pa je viabilnost ključnega pomena je bolj primerno izbrati nabore krajših setov pulzov saj omogočajo boljše preživetje celic.
COBISS.SI-ID: 9897812
Genska elektrotransfekcija je nevirusna metoda vnosa genov v celico, pri kateri uporabljamo visokonapetostne električne pulze. Z elektrotransfekcijo v celice in tkiva vnašamo različne molekule, kot sta DNK ali RNK. Metoda je zanimiva za biomedicinske aplikacije, vendar njeni mehanizmi še niso povsem raziskani. V nekaterih primerih je zelo pomembno, da transficirane celice preživijo in ohranijo svoje funkcije, zato smo se v našem prispevku osredinili na vpliv visokonapetostnih pulzov na preživetje celic, ki pulzom niso bile neposredno izpostavljene. Uporabili smo celično linijo CHO v razmerah in vitro in izvedli poskuse na pritrjenih in na celicah v suspenziji. Naši rezultati kažejo, da umirajoče ireverzibilno elektroporirane celice ne zmanjšajo preživetja celic, ki niso bile neposredno izpostavljene električnim pulzom. Pritrjene celice so bile izpostavljene snovem, ki so se sproščale v elektoporacijski medij, ker so rastle v isti gojitveni posodici kot elektroporirane celice, celice v suspenziji pa so bile izpostavljene supernatantu elektroporiranih celic. Preživetje celic smo opazovali 24 ur po elektroporaciji za pritrjene celice ter 24 in 48 ur po elektroporaciji za celice v suspenziji. Zanimivo je, da po 48 opazimo boljše preživetje celic, ki so bile izpostavljene supernatantu elektroporiranih celic. Potrebne so nadaljnje raziskave, ki bodo razjasnile ozadje tega pojava.
COBISS.SI-ID: 10517844