Testi za merjenje poškodb DNK po obsevanju z ionizirajočim sevanjem in testi genotoksičnosti kemikalij in farmacevtskih proizvodov, pesticidov, aditivov ter kozmetičnih proizvodov so pomembni za ocenitev zdravstvenih tveganj in so tudi zakonsko predpisani. Razvili smo nov test genotoksičnosti oz. celični biosenzorski sistem, ki temelji na stabilno transformirani celični linij raka jeter HepG2 z, od p21 odvisnim, reporterskim genom DsRED. Test smo pripravili s transfekcijo HepG2 celic s plazmidom, ki kodira za rdeči fluorescenti protein (DsRed) pod kontrolo promotorja gena za p21 (p21HepG2DsRed). Delovanje in občutljivost našega biosenzorskega sistema za odkrivanje poškodb DNK smo ovrednotili z genotoksičnimi agensi z znanim mehanizmom delovanja, kot so ionizirajoče sevanje in kemijski agensi cisplatin, metilmetansulfonat (MMS), benzo(a)piren (BaP) in vinblastin(VLB). Povišanje intenzitete fluorescence DsRed proteina zaradi aktivacije p21 promotorja smo merili s fluorescentnim čitalcem mikroplošč ob različnih časih po tretmaju. Viabilnost tretiranih celic smo določili s kolorimetričnim MTS testom. Preliminarni rezultati so pokazali, da obsevanje in ostali testirani agensi povzročijo dozno odvisno indukcijo v fluorescenci. Povišanje intenzitete fluorescence smo zabeležili že po 24 urah in to pri dozah, ki še niso bile citotoksične. S temi rezultati smo pokazali, da je naš novi test uporaben kot hiter in preprost biosenzorski sistem za odkrivanje genetskih napak.
COBISS.SI-ID: 1366651