Prof. Maja Čemažar je bila mentorica mladi raziskovalki Tanji Dolinšek, ki je v letu 2014 uspešno zagovarjala doktorsko nalogo z naslovom Antiangiogeni in protitumorski učinek genske terapije s kratkimi nekodirajočimi molekulami RNA proti endoglinu na mišjih tumorskih modelih.
D.09 Mentorstvo doktorandom
COBISS.SI-ID: 31328729V vabljenem predavanju smo predstavili metodo ne invazivnega slikanja fluorescence z vidika zaščite živali in njeno uporabnost v poskusih genske terapije. In vivo slikanje predstavlja uporabno orodje za dolgotrajno sledenje dinamičnih bioloških procesov, ki ne zahteva invazivnih postopkov na živalih. V poskusih genske terapije lahko metodo uporabimo za in vivo sledenje izražanja reporterskih genov in posredno tudi aktivnosti promotorjev, ki kontrolirajo njihovo izražanje. Uporabo metode smo v predavanju predstavili na primeru študije aktivnosti promotorja CMV. V tej raziskavi smo dokazali, da je neinvazivnega slikanja fluorescence resnično primerna metoda za sledenje aktivnosti promotorjev in vivo, ki tudi zadostuje osnovnemu etičnemu načelu poskusov na živalih, načelu teh R (zamenjava, zmanjšanje in izboljšanje).
B.04 Vabljeno predavanje
COBISS.SI-ID: 1811067Za razliko od virusnih vektorjev, nevirusni vektorji imajo več prednosti kot so varnost, nižja toksičnost in lažja priprava. Gen za odpornost proti antibiotikom je sestavni del terapevtskih plazmidov in omogoča selekcijo rekombinantnih plazmidov in njihovo namnožitev v gostiteljevem sevu. Zaradi globalnega širjenja bakterij odpornih proti antibiotikom v zadnjih dveh desetletjih, je zdravljenje nekaterih humanih in živalskih bolezni postalo težavno. Da bi se preprečil horizontalni prenos gena za odpornost proti antibiotikom, zdravstvene oblasti priporočajo uporabo vektorjev genski terapiji brez tega gena. Cilj študije je bil ugotoviti (1) ali lahko gen za odpornost proti ampicilinu v plazmidu pORF-hIL12, ki je bil uporabljen za elektrogensko zdravljenje mastocitov (MCT) pri psih, zaznamo dva in sedem dni po terapiji v kožni mikrobioti psov ter (2) raziskati kožno mikrobioto psov pred terapijo z namenom, da bi ocenili učinkovitost transformacije bakterij s plazmidom pORF-hIL12 in vitro. V študijo je bilo vključenih 6 psov s kožnimi in podkožnimi MCT, ki so bili zdravljeni z intratumorskim genskim elektroprenosom (EGT). Vzorci brisov, odvzetih takoj pred terapijo in dva ter sedem dni po terapiji, so bili nacepljeni na standardna gojišča. DNA je bila izolirana s pomočjo DNA izolacijskih kitov. Prisotnost gena za odpornost proti ampicilinu in/ali gena za hIL12 je bila ugotovljena s PCR z uporabo različnih oligonukleotidov in protokolov. Elektroporacija je bila uporabljena za in vitro transformacijo bakterij. Pri nobenem od šestih psov niso bile prisotne bakterije, ki vsebujejo gen za odpornost proti ampicilinu ali katerikoli drugi gen iz plazmida pORF-hIL12. In vitro transformacija bakterij s plazmidom pORF-hIL12 izoliranih s kože psov je bila neuspešna pri večini testiranih izolatov. Samo kompetentni sevi E.coli in Klebsiella sp. se lahko transformirajo v in vitro pogojih. Naši rezultati kažejo, da je horizontalni prenos gena za odpornost proti ampicilinu iz plazmida pORF-hIL12 v bakterije naravno prisotne na koži psov malo verjetno zaradi nezmožnosti uspešne transformacije in/ali replikacije plazmida v bakterijskih celicah gostitelja.
B.04 Vabljeno predavanje
COBISS.SI-ID: 3667066Prof. Maja Čemažar je urednica mednarodne revije Radiology and Oncology, ki izhaja v angleškem jeziku. Radiology and Oncology je multidisciplinarna revija, ki promovira tako slovensko kot tujo znanost na področju radiologije in onkologije v širšem mednarodnem prostoru.
C.04 Uredništvo mednarodne revije