Namen raziskave je bil ovrednotiti spremembe citoskeleta in integriteto monosloja humanih mikrovaskularnih endotelijskih celic (HMEC-1) in vitro po elektroporaciji ali elektrokemoterapiji z bleomicinom. Pokazali smo, da aplikacija električnih pulzov vpliva na samo morfologijo celic, do opaznih sprememb pa pride tudi na nivoju citoskeletnih proteinov, F-aktina in Beta-tubulina. Med elektroporacijo in elektrokemoterapijo so bile prve celične poškodbe opazne po 10 minutah (povečane celice in preureditev aktinskih vlaken v obliko, podobno satovju). Elektroporacija je na celičnem nivoju sprožila učinke pri električnih pulzih nad 150 V, ki so bili odvisni od napetosti in delno reverzibilni v 24 urah. Po elektrokemoterapiji z bleomicinom so bile spremembe celic opazne po dveh urah (zgoščena F-aktin in Beta-tubulin). Te spremembe so bile odvisne od koncentracije bleomicina in uporabljene napetosti električnih pulzov. Spremembe po elektrokemoterapiji z napetostjo električnih pulzov nad 150 V se v obdobju 24 ur po elektrokemoterapiji niso povrnile v začetno stanje. Po elektrokemoterapiji se je hitreje kot po sami elektroporaciji spremenila tudi integriteta monosloja endotelijskih celic (povečana prepustnost monosloja). Pokazali smo, da 24 ur po elektrokemoterapiji v primerjavi s samo elektroporacijo pride do hitrejših sprememb integritete monosloja in smrti endotelijskih celic, kar skupaj prispeva k boljšemu razumevanju celičnih sprememb pri žilno-razdiralnem učinku elektrokemoterapije.
COBISS.SI-ID: 1409403
Namen raziskave je bilo razumeti in pojasniti učinke elektropermeabilizacije na dinamiko (vazomotornost, permeabilnost in obnavljanje) subkutanih krvnih žil. Te učinke smo spremljali na modelu dorzalnega okna z različno velikimi in fluorescenčno označenimi dekstrani, intravitalnim slikanjem s fluorescenčno mikroskopijo in specifično analizo slik. Aplikacija električnih pulzov na kožo in vivo je povzročila hitro povečanje vaskularne permeabilnosti, ki se je postopoma vrnila na osnovni nivo po različnih časih po aplikaciji pulzov, odvisno od velikosti dekstranov. Sočasno je prišlo do takojšnega skrčenja krvnih žil, ki je bilo bolj izrazito pri arteriolah kot venulah. Vazokonstrikcija arteriol povzroči začasno vaskularno zaporo. Povečana permeabilnost sten majhnih žil ne glede na velikost dekstranov, ki so povezani z zakasnjeno prekrvavitvijo, pojasnjuje izboljšan vnos intravensko vbrizganih molekul (zdravila, vnos genov) v tkiva po elektropermeabilizaciji in vivo.
COBISS.SI-ID: 1348475
Namen raziskave je bil preučiti učinek kombinacije visoko-napetostnih (HV) in nizko-napetostnih (LV) pulzov na krvni pretok žil v koži s pomočjo intravitalne mikroskopije na modelu dorzalnega okna v miših s fluorescenčno označenimi dekstrani. Analiza slik sprememb v intenziteti fluorescence je pokazala, da elektroporacija sproži začasno konstrikcijo in poveča permeabilnost krvnih žil ter povzroči vaskularno zaporo. Naši rezultati so pokazali, da učinki elektroporacije, ki modificirajo krvni pretok v koži, prispevajo k infiltraciji imunskih celic na izpostavljenem območju. V kombinaciji s plazmidno DNA za cepljenje bi tako omogočili začetni in podaljšan stik imunskih celic z terapevtskimi proteini, ki jih kodira plazmidna DNA.
COBISS.SI-ID: 1293435