Endometrioza je zelo pogosta ginekološka bolezen, ki jo povezujemo s povečano lokalno sintezo estradiola in zmanjšanim zaščitnim delovanjem progesterona. Zmanjšano delovanje progesterone običajno razlagajo z odsotnostjo receptorja PR-B v bolezenskem tkivu, medtem ko vloga pred-receptorskega metabolizma še ni raziskana. V zdravem endometriju se progesteron metabolizira z encimi 20alfa-hidroksisteroid-dehidrogenazo (20alfa-HSD), 3alfa/beta-HSD in 5alfa/beta-reduktazami. Aldo-keto reduktazi 1C1 in 1C3 (AKR1C1 in AKR1C3) delujeta kot 20alfa-HSD, pa tudi 17beta-HSD tipa 2 (HSD17B2) katalizira to reakcijo. AKR1C encimi delujejo tudi kot 3alfa-HSD in 3beta-HSD. Medtem ko 5alfa-reduktaze tipa 1 in 2 (SRD5A1, SRD5A2) in 5beta-reduktaza (AKR1D1) pretvarjajo progesteron v 5alfa- in 5beta-reducirane pregnane. V tej študiji smo preoučevali izražanje genov PR-AB in genov, ki kodirajo za encime metabolizma progesterona v 31 vzorcih ovarijske endometrioze in 28 vzorcih normalnega endometrija. Analiza PCR v realnem času je razkrila signifikantno znižano izražanje genov PR-AB, HSD17B2 and SRD5A2, signifikanto povečano izražanje genov AKR1C1, AKR1C2, AKR1C3 in SRD5A1 in zanemarljivo izražanje gena AKR1D1. Iimunohistokemijsko barvanje je potrdilo nižjo raven PR-B le v epiteIijskih celicah, medtem ko razlike v stromalnih celicah nismo zaznali. Tudi raven AKR1C3 ni bila statistično značilno spremenjena, medtem ko smo proteina AKR1C2 zaznali več v stromalnih celicah ovarijske endometrioze v primerjavi z normalnim endometrijem. Naša ekspresijska študija na ravni mRNA in delno na ravni celic tako nakazuje pospešen metabolizem progesterona z encimi SRD5A1, AKR1C1, AKR1C2 in AKR1C3.
COBISS.SI-ID: 27920857
Z namenom identifikacije novih bioloških označevalcev endometrioze smo izbrali 152 genov iz baze podatkov GeneLogic, ki vključuje rezultate ekspresijskih študij celotnega genoma pri ovarijski endometriozi, dodali pa smo tudi 20 genov povezanih z metabolizmom in delovanjem estrogenov. Z analizo z mrežami nizke gostote smo preverili izražanje izbranih 172 genov v 11 vzorcih ovarijske endometrioze in 9 vzorcih kontrolnega endometrija. PCA analiza je razkrila jasno ločitev ekspresijskih podatkov v skupino bolnic z endometriozo in zdravih oseb. Med 179 geni je bilo 78 genov diferencialno izraženih. Na osnovi "Ingenuity" analize smo gene razvrstili v skupine glede na njihovo biološko vlogo. Analize so razkrile, da je 32 diferenčno izraženih genov povezanih z estrogeni, od teh jih 23 prej niso povezovali z endometriozo. Funkcionalna analiza je razkrila, da je 25 oz. 22 genov povezanih z biološkim terminom "sekretorni" in "ekstracelularni". Diferenčno izražanje 4 od 5 izbranih genov povezanih z metabolizmom in delovanjem estrogenov (ESR1, ESR2, PGR in BGN) smo potrdili tudi z imunohistokemijo. Naša študija je tako razkrila diferenčno izražanje genov, ki kodirajo za potencialne biološke označevalce ali tarče za razvoj zdravil, pa prej niso bili povezani z endometriozo.
COBISS.SI-ID: 28170457
Z metodo PCR v realnem času smo v 38 vzorcih raka in okolnega kontrolnega endometrija proučili izražanje genov I. in II. faze metabolizma estrogenov, ki kodirajao za encime: CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, CYP3A5, CYP3A7, SULT1A1, SULT1E1, SULT2B1, COMT, UGT2B7 in GSTP1. Pri raku endometrija smo zaznali signifikantno nižje izražanje CYP1B1 in CYP3A7, višje izražanje SULT2B1, UGT2B7 in GSTP1, medtem ko v izražanju genov COMT, CYP1A1, CYP3A5, SULT1E1 in SULT2A1 nismo našli razlik. Izražanje genov CYP1B1 in COMT smo potrdili tudi na ravni proteinov z metodama prenosa western in imunohistokemijskega barvanja. Zmanjšano izražanje CYP1B1 v tkivu raka endometrija kaže na njegovo pomembno vlogo v kontrolnem, predrakavem tkivu. Prvi smo na ravni proteinov pokazali večjo količino topnega COMT v rakavem tkivu in večjo količino membransko vezanega COMT v predrakavem tkivu. Pomen razlik v razmerju med topno in membransko vezano obliko proteina COMT bo potrebno proučiti v nadaljnjih študijah.
COBISS.SI-ID: 27490009