Izvedli smo proteomsko analizo proteaznih genov ter njihovih endogenih inhibitorjev, ki se diferencialno izražajo v tkivu in celicah (U87 in U373)glioblastoma multiforme (GBM) v primerjavi z normalnim tkivom in astrociti. S pomočjo bioinformatskih orodij smo odkrili vrsto dereguliranih genov proteaz in inhibitorjev. Izmed 311 proteaznih genov, ki smo jih določili kot povišano izražene v GBM tkivih in celicah , smo izbrali 5 najvišje izraženih genov, med katerimi je bil tudi gen za lizosomalno proteazo katepsin k (CTSK). CTSK izražanje smo preverili tudi z RT-qPCR metodo. Imunohstokemijsko barvanje in western blot analiza izražanja katepsina K je pokazala večinoma samo prisotnost neaktivne pro-oblike encima. Zaključimo lahko, da povečana prisotnost neaktivne oblike katepsina K tako v GBM tkivih, kot tudi v celicah nakazuje, da vloga katepsina K v tem tkivu najbrž ni proteolizno oz. kolagenolizno delovanje in da ima encim najbrž tudi drugo, še ne poznano vlogo v GBM.
COBISS.SI-ID: 3237711
V študiji smo proučevali uporabnost človeških mezenhimskih matičnih celic (MSC) v zdravljenju glioblastoma (GBM) najbolj maligne oblike možganskega tumorja. Ovrednotili smo medsebojni odziv celic MSC in GBM v indirektnih kulturah in vitro na nivoju signalnih proteinov (citokinov) in izražanja genov. Identificirali smo citokine, ki povzročajo spremembo fenotipa celic in razkrili izrazito povišano izločanje citokina CCL2/MCP-1 iz MSC. Odkrite gene/proteine smo prvi opisali v komunikaciji med GBM in MSC. Rezultati so uporabni za prihodnje vrednotenje tarčnih genov celičnem zdravljenju raka.
COBISS.SI-ID: 2432079
Navkljub novim metodam zdravljenja, ostaja glioblastoma multiforme (GBM) najbolj agresivna oblika možganskega raka z najkrajšim preživetjem. Arzenti se že uporablja v zdravljenju akutne promielocitne levkemije (APL), njegov učinek na GBM pa še ni dobro poznan. S testi metabolne aktivnosti in preživetja smo dokazali, da dolgodobno utišanje katepsina L (CatL) znantno poveča citotoksičnost arzenita v sferoidih U87. Utišanje CatL zviša apoptozo in aktivnost kaspaz 3/7. Ti rezultati se lahko prenesejo na translacijsko raven, saj bi z utišanjem CatL lahko znatno zmanjšali odmerek strupenega arzenita za dosego istega citotoksičnega učinka na GBM in vivo.
COBISS.SI-ID: 2870863
V tej študiji smo raziskali interakcije med človeškimi mezenhimskimi matičnimi celicami (MSC) in tumorskimi celicami z vidika uporabe terapevtskih MSC nosilcev. Razkrili smo, da gliomi privlačijo MSC s pomočjo gradienta izloočenih citokinov. Pokazali smo, da se takoglioma celicam kot MSC pri tem poveča izražanje koneksinov, preko katerih se celice direktno povezujejo s presledkovnimi stiki in tvorijo funkcijski in strukturni sincicij, zaradi česar se jim spremeni fenotip. Opisan fenomen omogoča nov vpogled v kompleksnost interakcij med tumorskimi celicami in celicami MSC pacienta.
COBISS.SI-ID: 2501199
Študija opisuje prvo potrditev napovedne vrednosti izražanja stefina A za preživetje pacientov z glioblastomo (GBM). Pri agresivni in visoko infiltrativni rasti humanih gliomov igra ključno vlogo skupina proteaz -cisteinski katepsini. Njihova aktivnost je dokazano povečana v invazivnih celicah GBM, najbrž tudi zaradi utišanja njihovih endogenih inhibitorjev cistatinov. Za potrditev te hipoteze in vivo smo izpeljali poskuse na U87 ksenograftnem modelu NOD/SCID-eGFP miši. In vivo smo tako prvi potrdili sovpadanje rasti tumorja s povečanjem aktivnosti katepsinov in znižanim izražanjem njihovih inhibitorjev stefinov. Z analizo primarnih humanih biopsij smo prvi razkrili povišan nivo izražanja stefina A na mRNA nivoju kot statistično značilen prognostični dejavnik za preživetje GBM pacientov.
COBISS.SI-ID: 2542159