Določanje spola pri hmelju je omejeno na fenotipsko ocenjevanje v drugem letu rasti hmeljnih rastlin. Tako v žlahtniteljskih programih kot pri kultivaciji hmelja pa je zaželjeno zgodnejše določanje spola, ki je omogočeno z uporabo molekulskih markerjev. Nedavno so s pomočjo DArT (»diversity arrays technology«) tehnike odkrili 730 polimorfnih markerjev v 92 akcesijah hmelja (Howard in sod. 2011). Pri šestih od teh DArT markerjev je prišlo do hibridizacije le v moških rastlinah in smo jih ocenili kot potencialne markerje za moški spol. Pogoje PCR reakcije smo lahko optimizirali za štiri od teh markerjev. S PCR reakcijo smo pomnoževali fragmente v 123 ženskih in 44 moških rastlinah iz različnih geografskih lokacij. Noben od teh štirih moških DArT markerjev se ni pomnoževal v ženskih rastlinah. Posamezni moški markerji se v manjšem številu moških rastlin neevropskega ali hibridnega porekla niso pomnoževali, vendar smo lahko vse moške rastline identificirali s kombinacijo štirih moških DArT markerjev. Naredili smo tudi začetne oligunukleotide, ki so pomnoževali fragmente različnih dolžin in optimizirali pogoje za triplex PCR reakcijo. Pri nekaterih akcesijah hmelja smo opazili dolžinski polimorfizem pomnoženih fragmentov z uporabo specifičnega moškega DArT markerja. S sekveniranjem teh fragmentov smo odkrili delecijo v skupni dolžini 52 bp pretežno v akcesijah ameriškega ali hibridnega porekla. Štirje novi moški DArT markerji se bodo lahko direktno uporabljali v žlahtniteljskih programih hmelja.
B.06 Drugo
COBISS.SI-ID: 7296121Analiza 58 obojespolnih rastlin hmelja, ki so izvirale iz različnih križanj diploidnih staršev, je razkrila visok delež triploidnih enodomnih rastlin. Poliploidi pri rastlinah se v naravi največkrat pojavijo kot posledica nastanka nereduciranih gamet. Merili smo ploidnost pelodnih zrn petih moških linij hmelja s pomočjo pretočne citometrije, pri čemer smo razvili nov protokol z mehansko poškodbo stene pelodnih zrn v zmrznjenem pufru. Pri nobeni analizirani moški liniji nismo odkrili nereduciranih gamet. Zato smo opravili analizo dedovanja alelov s šestimi kodominatnimi mikrosatelitnimi markerji, ki je pokazala, da so pretežno očetovske nereducirane gamete vpletene v razvoj triploidnih enodomnih rastlin. Pri diploidnih enodomnih rastlinah nismo odkrili povezave med vsebnostjo jedrne DNA in tipom izražanja spola z izjemo dejstva, da so imele moške rastline najnižjo vsebnost jedrne DNA. Moška rastlina, ki je bila prejšnjo rastno sezono enodomna, pa je imela višjo vsebnost jedrne DNA kot moške linije.
B.03 Referat na mednarodni znanstveni konferenci
COBISS.SI-ID: 7265913