Sindrom Antley-Bixler (ABS) predstavlja skupino heterogenih bolezni, za katere so značilne abormalnosti skeleta ter srčne in urogenitalne nepravilnosti, ki so bile pogosto povezane z mutacijami v receptorju za fibroblastni rastni faktor 2 ali v genu za citokrom P450 reduktazo. Pri nekaterih ABS bolnikih je bilo opaženo znižanje aktivnosti holesterogenega citokroma P450 CYP51A1, ki je ortolog mišjega Cyp51, opaženo pa je bilo tudi kopičenje lanosterola in 24,25-dihidrolanosterola. Vendar pa vloga CYP51A1 v etiologiji te bolezni ostaja nepojasnjena. Da bi preverili, če je Cyp51 lahko udeležen pri tvorbi ABS, smo pripravili model mišk z izničenim genom Cyp51. Model kaže mnoge prenatalne značilnosti ABS. Zarodki odmrejo pri dnevu 15 embrionalnega razvoja. Miške Cyp51(-/-) nimajo funkcionalne Cyp51 mRNA in imunoreaktivnega CYP51 proteina. Substrata encima CYP51 (lanosterol in 24,25-dihidrolanosterol) sta vidno povečana, medtem ko predhodnikov holesterola, ki nastanejo za stopnjo CYP51, ne zaznamo, iz česar sklepamo, da smo uspešno blokirali CYP51 in s tem de novo sintezo holesterola. V skladu s tem smo zaznali povečanje izražanja 10 genov iz sinteze holesterola, z izjemo 7-dehidroholesterol reduktaze. Smrt zarodkov smo pripisali odpovedi srca zaradi hipoplazije, razdeljenosti septuma ter okvar epikarda in tvorjenja žil, kar nakazuje, da je pomanjkanje Cyp51 vplivalo na razvoj srca in krvožilnega sistema. Opazili smo spremembe v signalnih poteh sonic hedgehog in retinojske kisline, kar nakazuje možna molekularna mehanizma. Miške z izničenim genom Cyp51 dokazujejo, da je Cyp51 nujen v embrionalnem razvoju, in predstavljajo nov potencialni model sindroma ABS pri ljudeh. TO JE PRVA TRANSGENSKA MIŠKA, KI JE BILA V CELOTI PRIPRAVLJENA V SLOVENIJI.
COBISS.SI-ID: 28610009
Citokromi P450 (CYP) katalizirajo raznolike reakcije in so ključni encimi v glivnem primarnem in sekundarnem metabolizmu, ter pri razstrupljanju ksenobiotikov. Encimske lastnosti in substratna specifičnost CYPov določajo produkte biokemijske reakcije, vendar pa lahko na slednje vplivajo tudi redoks partnerji CYPov. Nitaste glive s številnimi CYPi imajo ponavadi več mikrosomalnih redoks partnerjev, reduktaz citokromov P450 (CPR). Pri rastlinski patogeni glivi Cochliobolus lunatus smo določili dve paralogni CPR, CPR1 in CPR2. Naš cilj je bil funkcijsko določiti dva endogena P450 monooksigenazna sistema in osvetliti verjetne fiziološke vloge CPR1 in CPR2. Obe CPR smo rekonstituirali s CYP53A15 oz. benzoatno 4-hidroksilazo iz glive C. lunatus, ki je ključna pri razstrupljanju fenolnih rastlinskih obrambnih spojin. Biokemijska karakterizacija s HPLC kaže, da obe reduktazi podpirata aktivnost CYP53A15, vendar imata različni produktni specifičnosti. V sistemu s CPR1, CYP53A15 pretvarja benzoat v 4-hidroksibenzoat in 3-metoksibenzoat v 3-hidroksibenzoat. Ko je partner CPR2, sta oba substrata pretvorjena v 3,4-dihidroksibenzoat. Delecijske mutante in izražanje genov v miceliju, gojenem na gojiščih z inhibitorji, nakazujejo, da je CPR1 pomemben encim primarnega metabolizma, CPR2 pa je ključen pri razstrupljanju ksenobiotikov.
COBISS.SI-ID: 4729882
Med kandidatnimi geni za študij samomora je tudi gen, ki je vključen v razgradnjo kateholaminov in kodira encim katehol-O-metil-transferazo (COMT). Gen ima funkcijski polimorfizem, tranzicijo G v A, katere posledica je substitucija aminokisline valin (Val) v metionin (Met) na položaju 158 (COMT Val(108/158)Met; rs4680); ta je bil povezan s psihiatričnimi obolenji, katerih značilnost je povišano samomorilno vedenje. Kot prvi smo na kavkaških vzorcih ugotavljali povezavo med žrtvami samomora in polimorfizmom COMT Val(108/158)Met. Analizo smo opravili na 356 žrtvah samomora in 198 kontrolah. Statistično značilne razlike v porazdelitvi različic COMT Val(108/158)Met (genotipi, aleli in nosilci Val) smo ugotovili le za moške, in sicer med kontrolami in žrtvami samomora (p = 0,018; p = 0,031; p = 0,005) ter kontrolami in nasilnimi žrtvami samomora (p = 0,026; p = 0,042; p = 0,010). Vrednost R standardnega reziduala je pokazala, da je genotip Met/Met (R = 2,03) v kontrolni skupini doprinesel k statistični razliki. V nasprotju z moškimi, pri ženskih kontrolah in žrtvah samomora nismo ugotovili statistično značilnih razlik; poleg tega je bila statistična moč pod željeno vrednostjo 0,800 (razpon 0,161-0,680). Tudi logistična regresija je potrdila statsitično značilne razlike. Naši rezultati so torej pokazali povišano prisotnost genotipa Met/Met v moških kontrolah v primerjavi z žrtvami samomora, s čimer nakazujejo, da bi ta genotip COMT Val(108/158)Met lahko bil zaščitni dejavnik pred samomorom.
COBISS.SI-ID: 28292313