Karakterizirali smo delovanje lizosomotropnega reagenta LeuLeuOMe kot modela za ugotavljanje vloge cisteinskih katepsinov pri apoptozi. Ugotovili smo, da LeuLeuOMe sproži permeabilizacijo lizosomske membrane, kar vodi do sprostitve cisteinskih katepsinov v citosol, kjer nato procesirajo proapoptotski protein Bid in razgradijo antiapoptotske proteine Bcl-2, Bcl-xL in/ali Mcl-1. Glede na to, da se izražanje antiapoptotskih Bcl-2 in IAP proteinov pogosto zelo poviša pri različnih oblikah raka, pa lahko predpostavimo, da ima lizosomska destabilizacija velik potencial pri zdravljenju raka.
COBISS.SI-ID: 21719335
V tem delu smo kritično ovrednotili vlogo lizosomov in lizosomskih katepsinov pri treh poglavitnih tipih celične smrti, apoptozi, nekrozi in avtofagiji. Pri tem velja omeniti, da avtofagija verjetno ni mehanizem celične smrti, ampak preživetveni mehanizem. Članek temelji tudi na naših predhodnih rezultatih.
COBISS.SI-ID: 22640935
TNF je citokin, ki je pomemben mediator apoptoze in vnetja v mnogih bolezenskih stanjih. Dolgo je veljalo, da imajo pri s TNF sproženi apoptozi ključno vlogo kaspaze, vendar so nedavne študije pokazale tudi vpletenost cisteinskih katepsinov v potek apoptoze. V naši študiji smo z uporabo kaspaznih inhibitorjev potrdili pomembnost kaspaz pri TNF-alfa sproženi apoptozi, pri tem pa je prišlo tudi do destabilizacije lizosomov in sproščanja katepsinov v citosol. Z uporabo inhibitorjev katepsinov (E-64d in CA-074) pa smo ugotovili, da cisteinski katepsini ne vplivajo bistveno na hitrost apoptoze.
COBISS.SI-ID: 22717479
Pokazali smo, da je pri miših brez katepsina B zmanjšana stopnja proliferacije rakastih celic kot tudi širjenje metastaz v pljučih. Pri inkubaciji PyMT tumorskih celic s TNF-alfa nismo opazili nobenih genotipskih razlik pri sproženju apoptoze . Opazili pa smo, da so bile rakave celice brez katepsina B precej bolj odporne na apoptozo sproženo z LeuLeuOMe. Ti rezultati prvič kažejo na pomembno in vivo vlogo katrepsina B pri širjenju celične anaplazije pri raku mlečne žleze in proliferaciji pljučnih metastaz.
COBISS.SI-ID: 21554983
V tem delu smo zaznali prisotnost katepsina B v jedru. To smo potrdili z biokemijskimi metodami ter dokazali da je jedrna oblika katepsina B tudi proteolitsko aktivna. Poleg tega smo pokazali, da se v jedru HTh74 celic nahaja tudi katepsin V, ne pa katepsin L. Na podlagi kolokalizacijskih študij in intro testih razgradnje smo predpostavili, da jedrne oblike katepsinov sodelujejo pri malignih procesih preko modifikacije proteinov povezanih z DNA.
COBISS.SI-ID: 23800615