Elektrokemoterapija (EKT) je učinkovita lokalna tehnika ablacije tumorja, z objektivnim odzivom nad 80%. Kljub temu ima različno učinkovitost pri različnih histoloških vrstah tumorjev. EKT zdravljenje bazalnoceličnega karcinoma je najučinkovitejše, pri čemer pride v približno 90% do popolnih odzivov (CR), sledi melanom (60-70% CR), medtem ko je pri raku dojke popolnih odzivov le okoli 50%. Zato je za povečanje stopnje CR potrebno kombiniranje EKT s cisplatinom ali bleomicinom z drugimi terapijami. Ena od možnosti je dodajanje zaviralcev mehanizma popravljanja poškodb DNA, v našem primeru polimeraza (adenozin-difosfat-riboza (ADP)) ali PARP. PARP1 in 2 sta potrebna za popravilo enojnih prelomov, medtem ko PARP1 sodeluje tudi pri popravljanju dvojnih prelomin zaustavljanju replikacijskih vilic. Zato je cilj naše študije kombinirati EKT s cisplatinom ali bleomicinom z zaviralcem PARP olaparibom v celični liniji raka dojke MCF7 in vitro. Uporabili smo standardne EKT pulze (8 pulzov, 100 µs, 1300 v / cm, 1Hz). Najprej smo spremljali citotoksični učinek obeh zdravil. Toksičnost naraščajočih odmerkov olapariba smo prav tako testirali na MCF7, vendar brez električnih pulzov, saj je olaparib zelo permeabilno zdravilo. Kombinacijo IC50 odmerka cisplatacije ali bleomicina in olapariba smo nato preizkusili v celicah in kasneje na 3D celičnih kulturah, sferoidih in vitro. Rast celic po kombinirani terapiji je bila izmerjena s testom PrestoBlue in rast sferoidov po kombinirani terapiji z merjenjem premera in površine. Najprej smo določili IC50 odmerek za cisplatin in bleomicin. Za kombinacijo smo izbrali odmerek olapariba, ki sam po sebi ni povzročil statistično pomembne celične smrti (5 µM). Po kombiniranem odmerku IC50 citotoksičnega zdravila za EKT in olapariba se je rast celic MCF7 na 5. dan po zdravljenju znatno zmanjšala, za 80%. Podoben učinek smo opazili pri sferoidih, kjer se je premer in njihova površina zmanjšala po kombiniranem zdravljenju z bleomicinom. Immunofluorescenčno barvanje je pokazalo povečano število žarišč ?-H2AX po EKT in EKT v kombinaciji z olaparibom. Dokazali smo, da kombinacija EKT z zaviralcem PARP olaparibom v celični liniji raka dojke MCF7 poveča učinkovitost EKT. EKT povzroči prelome DNK, katerih popravilo je oteženo zaradi dodanega zaviralca PARP, olapariba.
COBISS.SI-ID: 3333755