Astrociti uravnajavo homeostazo v osrednjem živčevju in vplivajo na številne procese prek znotraceličnega transporta mešičkov. Intermediatni filamenti (IFs), poznani tudi kot nanofilamenti, uravnavajo številne procese vključujoč transport organelov in nevrogenezo v odraslem hipokampusu. Raziskovali smo vlogo nestina v dinamiki mešičkov tako, da smo raziskovali interakcijo posameznega mešička s plazmalemo z visiko ločljivostno metodo meritve membranske kapacitete in konfokalno mikroskopijo. Rezultati so razkrili da v Nes-/- astrocitih mešički z različnimi premeri vsopajo v proces fisije in prehodne fuzije, imajo spremenjeno geometrijo fuzijske pore, imajo znižano frekvenco spontane fuzije in spremenjeno z ATP izzvano mobilnost.
COBISS.SI-ID: 34563545
Astrociti so ključne celice, ki vzdržujejo homeostazo v osrednjem živčevju in inicijacija reaktivne astroglioze prispeva k nevroinflamaciji. Pro-vnetni citokin interferon [gamma] (IFN[gamma]) inducira ekspresijo poglavitnega histokompatibilnostneg kompleksa II (MHCII), ki je vpleten v predstavitev antigenov v reaktivnih astrocitih. Astrocite smo raziskovali z optofiziološkimi orodji in raziskovali subcelično immunolokalizacijo MHCII in z elektrofiziologijo interakcijo posameznega mešička s plazmalemo. V kulturi in organotipičnih rezinah je IFN gamma zvišal ekspresijo MHCII, kar je dobro kolokaliziralo z lizosomalnim označevalcem LAMP1-EGFP, Rab7, a ni kolokaliziralo z endosomskimi markerji Rab4A, EEA1, in TPC1. V IFN[gamma]-tretiranih astrocitih se poveča frakcija interakcij mešičkov z večjim premerom (lizosomov) s podaljšano dobo odprtosti in večjum premerom pore.
COBISS.SI-ID: 34551513
Ketamin je antidepresiv s hitrim pričetkom delovanja in dolgotrajnim učinkovanjem, a mehanizmi delovanja ostajajo nepoznani. Uporabili smo FRET-nanosenzorje in ugotovili, da ketamin zviša [cAMP]i v astrocitih. Meritve membranske kapacitete so razkrile temeljno razliko učinkov ketamina in [cAMP]i na vezikularno sekrecijo: zvišanje [cAMP]i facilitira, medtem ko ketamin inhibira eksocitozo. Z neposrednim spremljanjem membranskih domen obogatenih s holesterolom prek fluorescentno označenega za holesterol specifične vezavne domene (D4) toksina perfringolizina O, smo pokazali, da ketamin inducira redistribucijo holesterola v plazmalemi v astrocitih, a ne v fibroblastih niti v vcelicah PC 12. Ta novi mehanizem kaže da ketamin vpliva na gostoto in distribucijo holesterola v plazmalemi astrocita, posledično s tem modulira veliko procesov, ki lahko prispevajo k hitrem antidepresivnem učinkovanju ketamina.
COBISS.SI-ID: 34434009